液相色譜儀是屬于易學難用的儀器研究進展,特別講究“正確使用”和經驗要素配置改革。
液相工作者接觸zui多的是流動相,也就是流動相溝通機製,是造成液相色譜各種問題的zui主要源頭無障礙。
液相色譜儀zui常見的故障一是堵,二是漏宣講活動。下面我們來談一下“堵”的情況高產。(注:流動相以甲醇為例,色譜柱以C18為例)
“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高,直接原因就是流路不暢帶動產業發展。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端工藝技術,zui主要原因就是流動相里有雜質,雜質的主要來源就是細菌。
“堵”的原因之一:配制流動相時細菌污染
首先系統,我們要認識到,一般的國產甲醇其實不需要額外過濾處理更加廣闊,直接使用沒有問題系統性。即使是有些固態(tài)微粒雜質,也能在液相流路系統(tǒng)zui前端的過濾頭上排除形式,真正容易引起問題的覆蓋範圍,是水中的細菌。
新制備的純水在室內放置幾天就會長菌功能,而這些細菌雖然肉眼不可見前沿技術,卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙,造成柱子很快報廢積極性。這就是在配制流動相時造成的細菌污染的原因深入交流,解決它的方法很簡單,就是確保水的可靠性性能。這里有兩種方式推薦:
(1)的方式當然是購買實驗室純水機動力,既方便又可靠,質量也放心方案。*的缺點就是價格不菲多種方式。
(2)成箱購買市售品牌純凈水,如實施體系,500mL一支的怡寶或娃哈哈臺上與臺下,這些水的質量足以應付液相色譜的要求。先隨機抽取一支做一下細菌平板實驗技術創新,待菌落數(shù)合格方可使用效高性。這樣每次只要單獨開一支即可,也很方便技術發展。每次成本2元左右重要的作用。
※這里特別指出一個細節(jié):在絕大多數(shù)書本上,凡談到配制流動相都會談到zui后有一個過濾的步驟自動化。但是從我們長期使用的實際效果來說顯著,只要能保證水的質量,這一步*可以也應當去除更優美。
原因有以下三點:
(1)流動相過濾在理論上有好處需求,但是,實際操作時由于不可能做到專瓶,反而容易造成的交叉污染各方面,對于配比復雜的流動相影響更大堅定不移。
(2)流動相過濾在經濟成本上不劃算。買一套過濾裝置要6000多元技術交流,且過濾器*是比較容易損壞的設備交流。zui主要是過濾片的成本太高,一片就要幾十元關註。按一般液相柱的正常使用壽命計算溝通協調,過濾片的成本會遠遠高于色譜柱的成本。
(3)流動相過濾對于工作效率成本不劃算提供堅實支撐。使用溶劑過濾器有一個預清洗活動、裝備、使用創造更多、用后清洗還不大,晾干的過程,至少也有一個小時的時間連日來。這個成本也不能忽視保障性。
(4)在實際工作未發(fā)現(xiàn)流動相不過濾會對柱壽命有任何影響。我們起碼有6年時間沒有做過流動相過濾的工作信息化技術,但是和國內同行相比較領先水平,在同等使用強度下我們的柱壽命是比較長的。
“堵”的原因之二:使用流動相時的細菌污染責任製。
指的是:
流動相剛開始沒有長菌效率,在使用時卻產生了細菌污染。這主要是在使用多元液相色譜儀時的一種不良使用習慣造成的去完善。
舉zui簡單的例子:
50%的甲醇水流動相意料之外,有兩種使用方式必然趨勢。一種方式是在上機前就配好混合在一起設備,另一種方式是在流路A放純甲醇,流路B放純水文化價值。
從單純實驗效果來說促進善治,后一種有明顯的優(yōu)點:首先是簡單,不需要實驗者另個計算配比混合單產提升,其次就是比例準確求索,能得到保留時間重復性*的實驗效果。
但是多樣性,它有一個致命的缺陷性能穩定,就是純水在流動相瓶中幾天時間就會長細菌(很多情況下不僅僅用純水作流動相試驗,而是用緩沖鹽溶液,本身就是肥料經驗,細菌長得更迅速),一旦有細菌柱子就壞得很快。所以這種方式要求操作人員每次實驗都要用新制備的純水敢於監督,更要求在每次實驗后把水相換掉對外開放,換成甲醇沖洗干凈,這一點在實際工作中很多人意識不強組建,就是意識到了但多次使用中總有一兩次會遺漏用的舒心,但是往往這一兩次就足以產生致命的影響。因為液相色譜柱的堵塞是不可逆的深入交流研討。
所以模式,寧可犧牲小小的保留時間的重復性,也不要用純水溶液作為流動相的一組品牌。從實際實驗效果來說適應能力,我建議用10%的甲醇水代替純水溶液(以前我做過不同比例甲醇水的細菌總數(shù)實驗,在5%就基本可以抑菌節點,在10%及以上就可以*殺菌了)快速增長,這樣可以有效排除長細菌的隱患,既可作流動相,也可沖柱通過活化。就算是在配制流動相時會計算得麻煩一些,但是一次麻煩等形式,終身受益防控。
“堵”的原因之三:不適當操作。
常見問題的有以下幾種:
(1)在更換零件時選擇的型號有誤的特點,接口不是很匹配高質量,在擰緊的時候產生變形而使得管路堵塞。
(2)樣品處理液凈化得不干凈適應性,長期會在六通閥和柱之間形成阻塞不暢迎難而上。
(3)在使用手動六通閥時,有些人可能由于手勁小的原因激發創作,轉動的不到位更高效,于是造成流路形成了死堵,壓力快速升高超過警戒值探索。
(4)在使用金屬管路作出廢液管時,應當注意廢液瓶中先放一些水,并把廢液管的出口端放在液面下註入新的動力。如果位于在液相上且實驗使用較高濃度的緩沖鹽溶液快速融入,在停機時可能在出口端結晶成塊并造成堵塞帶動產業發展。這種情況不常見,但卻的確發(fā)生過發揮作用。
“堵”的原因講了不少新產品,現(xiàn)介紹查堵的方法。
在發(fā)生“堵”的現(xiàn)象后持續發展,就需要找出原因更加廣闊,主要是什么位置發(fā)生了“堵”。注意合作,絕大多數(shù)情況下,整個系統(tǒng)只會有一個地方發(fā)生堵塞。
查堵的方法是從尾向前逆向分段拆開勇探新路,仔細觀察壓力數(shù)值長遠所需,如果某一個部件(柱子除外)裝上和拆下時的壓力差別很大,可發(fā)展變化判斷擴大。至于柱的堵塞非常完善,可以通過換同樣規(guī)格的柱的壓力是否一致來判斷。