液相色譜儀是屬于易學(xué)難用的儀器，特別講究“正確使用”和經(jīng)驗(yàn)各方面。
液相工作者接觸zui多的是流動相堅定不移，也就是流動相，是造成液相色譜各種問題的zui主要源頭占。
液相色譜儀zui常見的故障一是堵技術的開發，二是漏。下面我們來談一下“堵”的情況更讓我明白了。（注：流動相以甲醇為例健康發展，色譜柱以C18為例）
“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高，直接原因就是流路不暢飛躍。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端堅實基礎，zui主要原因就是流動相里有雜質(zhì)，雜質(zhì)的主要來源就是細(xì)菌最為突出。
“堵”的原因之一：配制流動相時細(xì)菌污染
首先逐步改善，我們要認(rèn)識到，一般的國產(chǎn)甲醇其實(shí)不需要額外過濾處理，直接使用沒有問題落實落細。即使是有些固態(tài)微粒雜質(zhì)，也能在液相流路系統(tǒng)zui前端的過濾頭上排除組成部分，真正容易引起問題的深入闡釋，是水中的細(xì)菌。
新制備的純水在室內(nèi)放置幾天就會長菌高效化，而這些細(xì)菌雖然肉眼不可見大大提高，卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙，造成柱子很快報廢完成的事情。這就是在配制流動相時造成的細(xì)菌污染的原因調整推進，解決它的方法很簡單，就是確保水的可靠性研究成果。這里有兩種方式推薦：
（1）的方式當(dāng)然是購買實(shí)驗(yàn)室純水機(jī)發展契機，既方便又可靠，質(zhì)量也放心機製性梗阻。*的缺點(diǎn)就是價格不菲講故事。
（2）成箱購買市售品牌純凈水，如求索，500mL一支的怡寶或娃哈哈置之不顧，這些水的質(zhì)量足以應(yīng)付液相色譜的要求。先隨機(jī)抽取一支做一下細(xì)菌平板實(shí)驗(yàn)，待菌落數(shù)合格方可使用試驗。這樣每次只要單獨(dú)開一支即可規模，也很方便。每次成本2元左右進行探討。
※這里特別指出一個細(xì)節(jié)：在絕大多數(shù)書本上緊密協作，凡談到配制流動相都會談到zui后有一個過濾的步驟提供有力支撐。但是從我們長期使用的實(shí)際效果來說管理，只要能保證水的質(zhì)量，這一步*可以也應(yīng)當(dāng)去除越來越重要。
原因有以下三點(diǎn)：
（1）流動相過濾在理論上有好處切實把製度，但是，實(shí)際操作時由于不可能做到專瓶改革創新，反而容易造成的交叉污染最新，對于配比復(fù)雜的流動相影響更大。
（2）流動相過濾在經(jīng)濟(jì)成本上不劃算自行開發。買一套過濾裝置要6000多元模樣，且過濾器*是比較容易損壞的設(shè)備。zui主要是過濾片的成本太高處理方法，一片就要幾十元數據顯示。按一般液相柱的正常使用壽命計(jì)算，過濾片的成本會遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于色譜柱的成本服務。
（3）流動相過濾對于工作效率成本不劃算實現。使用溶劑過濾器有一個預(yù)清洗、裝備舉行、使用、用后清洗，晾干的過程習慣，至少也有一個小時的時間記得牢。這個成本也不能忽視。
（4）在實(shí)際工作未發(fā)現(xiàn)流動相不過濾會對柱壽命有任何影響適應性。我們起碼有6年時間沒有做過流動相過濾的工作迎難而上，但是和國內(nèi)同行相比較，在同等使用強(qiáng)度下我們的柱壽命是比較長的動手能力。
“堵”的原因之二：使用流動相時的細(xì)菌污染服務品質。
指的是：
流動相剛開始沒有長菌，在使用時卻產(chǎn)生了細(xì)菌污染充分。這主要是在使用多元液相色譜儀時的一種不良使用習(xí)慣造成的過程。
舉zui簡單的例子：
50％的甲醇水流動相，有兩種使用方式。一種方式是在上機(jī)前就配好混合在一起進一步完善，另一種方式是在流路A放純甲醇相結合，流路B放純水。
從單純實(shí)驗(yàn)效果來說影響，后一種有明顯的優(yōu)點(diǎn)：首先是簡單相關性，不需要實(shí)驗(yàn)者另個計(jì)算配比混合，其次就是比例準(zhǔn)確製高點項目，能得到保留時間重復(fù)性*的實(shí)驗(yàn)效果的必然要求。
但是，它有一個致命的缺陷物聯與互聯，就是純水在流動相瓶中幾天時間就會長細(xì)菌（很多情況下不僅僅用純水作流動相狀況，而是用緩沖鹽溶液，本身就是肥料取得了一定進展，細(xì)菌長得更迅速）業務，一旦有細(xì)菌柱子就壞得很快。所以這種方式要求操作人員每次實(shí)驗(yàn)都要用新制備的純水有所增加，更要求在每次實(shí)驗(yàn)后把水相換掉完善好，換成甲醇沖洗干凈，這一點(diǎn)在實(shí)際工作中很多人意識不強(qiáng)供給，就是意識到了但多次使用中總有一兩次會遺漏全過程，但是往往這一兩次就足以產(chǎn)生致命的影響。因?yàn)橐合嗌V柱的堵塞是不可逆的可能性更大。
所以鍛造，寧可犧牲小小的保留時間的重復(fù)性，也不要用純水溶液作為流動相的一組使命責任。從實(shí)際實(shí)驗(yàn)效果來說共謀發展，我建議用10％的甲醇水代替純水溶液（以前我做過不同比例甲醇水的細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn)，在5％就基本可以抑菌，在10％及以上就可以*殺菌了）營造一處，這樣可以有效排除長細(xì)菌的隱患，既可作流動相線上線下，也可沖柱保供。就算是在配制流動相時會計(jì)算得麻煩一些，但是一次麻煩知識和技能，終身受益技術創新。
“堵”的原因之三：不適當(dāng)操作。
常見問題的有以下幾種：
（1）在更換零件時選擇的型號有誤進行部署，接口不是很匹配生產體系，在擰緊的時候產(chǎn)生變形而使得管路堵塞新模式。
（2）樣品處理液凈化得不干凈，長期會在六通閥和柱之間形成阻塞不暢高質量。
（3）在使用手動六通閥時應用情況，有些人可能由于手勁小的原因，轉(zhuǎn)動的不到位，于是造成流路形成了死堵也逐步提升，壓力快速升高超過警戒值。
（4）在使用金屬管路作出廢液管時能力和水平，應(yīng)當(dāng)注意廢液瓶中先放一些水組織了，并把廢液管的出口端放在液面下。如果位于在液相上且實(shí)驗(yàn)使用較高濃度的緩沖鹽溶液智能設備，在停機(jī)時可能在出口端結(jié)晶成塊并造成堵塞解決問題。這種情況不常見服務效率，但卻的確發(fā)生過不要畏懼。
“堵”的原因講了不少，現(xiàn)介紹查堵的方法蓬勃發展。
在發(fā)生“堵”的現(xiàn)象后作用，就需要找出原因，主要是什么位置發(fā)生了“堵”問題。注意應用的選擇，絕大多數(shù)情況下，整個系統(tǒng)只會有一個地方發(fā)生堵塞。
查堵的方法是從尾向前逆向分段拆開集聚，仔細(xì)觀察壓力數(shù)值，如果某一個部件（柱子除外）裝上和拆下時的壓力差別很大大大提高，可發(fā)展變化判斷新的動力。至于柱的堵塞，可以通過換同樣規(guī)格的柱的壓力是否一致來判斷調整推進。
