液相色譜儀操作（一）

　　液相色譜儀(HPLC)現(xiàn)已成為有機(jī)化學(xué)分析的重要手段之一成就。同樣初步建立，在食品分析中，無論是殘留分析還是成分分析相對開放，HPLC也已成為*的分析儀器重要方式。和其它分析儀器一樣，你若想讓HPLC很好地為你工作臺上與臺下、得到可靠的數(shù)據(jù)幅度，首先你要保養(yǎng)好它，使它處于一個(gè)良好的待機(jī)狀態(tài)效高性，這樣你操作它進(jìn)行分析時(shí)就可以比較順利地獲得理想的結(jié)果各有優勢。而且良好規(guī)范的操作習(xí)慣可以延長(zhǎng)儀器使用壽命。大家在學(xué)兄匾淖饔?；蚪邮軆x器公司培訓(xùn)的時(shí)候資料，老師或工程師會(huì)提出很多的操作注意事項(xiàng)。但要是總結(jié)歸納一下，zui重要的有三點(diǎn)：脫氣方式之一、過濾和沖洗。本文圍繞這三點(diǎn)進(jìn)行討論深刻認識，給新從事HPLC分析的工作者一點(diǎn)操作建議首要任務，希望能對(duì)正確的操作儀器有一點(diǎn)幫助。更歡迎有經(jīng)驗(yàn)的專家介紹使用經(jīng)驗(yàn)新型儲能，提出好建議深入實施。

　　一、脫氣

　　流動(dòng)相脫氣對(duì)于避免液相色譜系統(tǒng)出問題不同需求，順利得到一個(gè)理想的數(shù)據(jù)是一個(gè)很有效的措施業務指導。HPLC系統(tǒng)內(nèi)是不希望有氣泡存在的。HPLC泵在輸送液體時(shí)要產(chǎn)生很大的力量發展空間，由于氣體的壓縮比與液體相比大的多創造性，因而當(dāng)氣泡存在時(shí)保持穩定，你將觀察到瞬間的流速降低和系統(tǒng)壓力下降。如果這個(gè)氣泡足夠大能力，液相泵將不能輸送任何溶劑，而且如果壓力低于預(yù)先設(shè)定的壓力低限，泵將停止工作還不大。有些泵設(shè)計(jì)可以很好地排除氣泡好宣講，而也有一些泵設(shè)計(jì)當(dāng)氣泡存在時(shí)將停止運(yùn)轉(zhuǎn)。

　　當(dāng)一個(gè)氣泡通過輸液泵時(shí)保障性，由于系統(tǒng)壓力大不斷進步，氣泡通常會(huì)溶解在流動(dòng)相溶液中，隨流動(dòng)相通過柱子領先水平。但是到達(dá)檢測(cè)器流通池時(shí)系統(tǒng)壓力又恢復(fù)到了大氣壓認為，因而氣泡可能在檢測(cè)器流通池中又顯現(xiàn)，在色譜圖上會(huì)出現(xiàn)不規(guī)律的毛刺效率。為解決這個(gè)問題良好，有些儀器公司設(shè)計(jì)一個(gè)反壓控制器，這樣可以在檢測(cè)器出口提供足夠的壓力保持氣泡始終溶解在流動(dòng)相中直到它們流出檢測(cè)器增強。當(dāng)然倍增效應，這個(gè)壓力不能超過流通池所能承受的壓力極限，否則可能損壞檢測(cè)器大部分。

　　紫外/可見光(UV/VIS)檢測(cè)器的液相色譜圖中的噪音毛刺通常是氣泡進(jìn)入并通過流通池的征兆重要工具。有些檢測(cè)器對(duì)空氣的存在也非常敏感，但表現(xiàn)出的征兆與UV/VIS不同更加堅強，例如有報(bào)導(dǎo)說提供有力支撐，當(dāng)使用熒光(FL)檢測(cè)器時(shí)，流動(dòng)相中溶解氧的存在可能會(huì)使一些化合物失去熒光性配套設備。此外發展成就，對(duì)于利用待測(cè)物質(zhì)在電極表面發(fā)生氧化還原反應(yīng)引起電流變化而進(jìn)行檢測(cè)的電化學(xué)(EC)檢測(cè)器，對(duì)流動(dòng)相中的溶解氧的存在也非常靈敏建議。此外優勢，氣泡的存在有時(shí)還會(huì)導(dǎo)致保留時(shí)間不重現(xiàn)。

　　所以，必須注意消除流動(dòng)相中的空氣品率，并且還應(yīng)避免空氣由管路(如PTFE管)滲透進(jìn)流動(dòng)相中。

　　如果適當(dāng)?shù)仃P(guān)注在使用之前脫去流動(dòng)相中溶解進(jìn)的空氣對外開放，上述這些問題均能避免互動式宣講，或把影響降至zui低組建。常用的脫氣方法有如下幾種：

　　1. 吹氦脫氣法用的舒心。利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性結構，在0.1MPa壓力下，以約60mL/min流速通入流動(dòng)相儲(chǔ)液容器中10～15min模式，可以很有效地從流動(dòng)相中排除溶解的空氣效果較好，能排除接近80%的氧氣。采用一個(gè)分布式噴射流裝置貢獻，一體積的氦氣可從流動(dòng)相中將等體積的幾乎全部氣體排除廣泛應用。這意味著1L氦氣通過1L流動(dòng)相就可完成排氣這個(gè)工作。這種脫氣方法雖然好持續，但我們國(guó)內(nèi)氦氣價(jià)格較高情況，很少有實(shí)驗(yàn)室采用此方法。

　　2. 加熱回流法高品質。此法的脫氣效果較好等多個領域。在操作時(shí)要注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑會(huì)丟失統籌，混合流動(dòng)相的比例會(huì)有變化哪些領域。

　　3.抽真空脫氣法。此法可使用真空泵發展，降壓至0.05～0.07MPa即可除去溶解的氣體改進措施。但是由于真空脫氣會(huì)使混合溶劑組成發(fā)生變化，從而影響到實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性效果，因此多用于單溶劑體系的簡(jiǎn)單分析發展的關鍵。

　　4. 超聲波脫氣法。將欲脫氣的流動(dòng)相置于超聲波清洗器中溝通機製，用超聲波震蕩10～20min無障礙。此法的脫氣效果zui差。

　　5.在線脫氣法⌒v活動，F(xiàn)在商品的HPLC儀器高產，均可配在線脫氣機(jī)。在線脫氣使用簡(jiǎn)單快速融入，低故障帶動產業發展，有效。建議購買儀器時(shí)一定要購買發揮作用，有的公司是作為選購件，所以與購買公司談配置時(shí)應(yīng)與公司確認(rèn)。