1 液相色譜儀系統(tǒng)
液相色譜儀主要由貯液瓶支撐作用、泵、進(jìn)樣器領先水平、柱子認為、柱溫箱責任製、檢測(cè)器效率、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。對(duì)于整個(gè)系統(tǒng)而言，柱子建言直達、泵和檢測(cè)器是核心部件同時(shí)也是易出問(wèn)題的主要部位大幅拓展。
2 常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法
液相作為一種高精密儀器，如果在使用過(guò)程中不按照正確操作的話(huà)大部分，就容易導(dǎo)致一些問(wèn)題重要工具。其中zui常見(jiàn)的就是柱壓?jiǎn)栴}、漂移問(wèn)題更加堅強、峰型異常問(wèn)題提供有力支撐。
2.1 柱壓?jiǎn)栴} 柱壓?jiǎn)栴}是使用液相色譜過(guò)程中需要密切注意的地方，柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞配套設備、柱效發展成就、分離效果及保留時(shí)間等密切相關(guān)。所謂柱壓穩(wěn)定并不是指壓力值穩(wěn)定于一個(gè)恒定值而是指壓力波動(dòng)范圍在50PSI（3.3 Bar）之間（在使用梯度洗脫時(shí)建議，柱壓平穩(wěn)緩慢的變化是允許的）優勢。壓力過(guò)高、過(guò)低都屬于柱壓?jiǎn)栴}。
2.1.1 壓力過(guò)高 這是液相在使用中zui常見(jiàn)的問(wèn)題品率，指的是壓力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因推進高水平。此時(shí)開展面對面，我們應(yīng)該分段進(jìn)行檢查。
(1).首先斷開(kāi)真空泵的入口處不斷發展，此時(shí)PEEK管里充滿(mǎn)液體結構，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下模式，如果液體不滴或緩慢滴下效果較好，則是溶劑過(guò)濾頭堵塞。處理方法：用30%的硝酸浸泡半個(gè)小時(shí)貢獻，在用超純水沖洗干凈廣泛應用。如果液體自由滴下，溶劑過(guò)濾頭正常持續，在檢查情況；
(2).打開(kāi)Purge閥，使流動(dòng)相不經(jīng)過(guò)柱子核心技術，如果壓力沒(méi)有明顯下降綠色化，則是過(guò)濾白頭堵塞。處理方法：將過(guò)濾白頭取出創新能力，用10%的異丙醇超聲半個(gè)小時(shí)至關重要。如果壓力降至100PSI (6.7 Bar)以下主動性，過(guò)濾白頭正常，在檢查改進措施；
(3).把色譜柱出口端取下範圍，如果壓力不下降，則是柱子堵塞發展的關鍵。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞有所應，則要用比現(xiàn)在流動(dòng)相更強(qiáng)的流動(dòng)相沖至壓力正常道路。假如按上面的方法長(zhǎng)時(shí)間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上今年，用流動(dòng)相沖洗柱子註入新的動力。這時(shí)，如果柱壓仍不下降帶動產業發展，只有換柱子入口篩板工藝技術，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以盡量少用系統。
2.1.1 壓力過(guò)低 壓力過(guò)低的現(xiàn)象一般是由于系統(tǒng)泄漏，處理方法：尋找各個(gè)接口處規模，特別是色譜柱兩端的接口逐步顯現，把泄漏的地方旋緊即可。當(dāng)然還有一個(gè)原因就是泵里進(jìn)了空氣，但此時(shí)表現(xiàn)的往往是壓力不穩(wěn)近年來，忽高忽低，更嚴(yán)重一點(diǎn)會(huì)導(dǎo)致泵無(wú)法吸上液體事關全面。處理方法：打開(kāi)Purge閥交流等，用3~5ml/min的流速?zèng)_洗，如果不行發展目標奮鬥，則要用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出自動化裝置。
2.2．漂移問(wèn)題 主要包括基線漂移和保留時(shí)間漂移。
2.2.1基線漂移 一般說(shuō)來(lái)更優質，機(jī)器剛起動(dòng)時(shí)成就，基線容易漂移，大概要半個(gè)小時(shí)的平衡時(shí)間項目，如果你用了緩沖溶液或緩沖鹽相對開放，還有就是在低波長(zhǎng)下（220nm）平衡時(shí)間相對(duì)會(huì)比較長(zhǎng)，但如果你在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)基線漂移綜合運用，則你要考慮下面的原因：
1相貫通、柱溫波動(dòng)增產。解決方法：控制好柱子和流動(dòng)相的溫度，檢查是否有打開(kāi)的窗戶(hù)或空調(diào)對(duì)著柱溫箱效高性。
2、流通池被污染或有氣體技術發展。 解決方法：用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池（斷開(kāi)柱子）重要的作用。如有需要，可以用1N的硝酸（不要用鹽酸）自動化。
3重要的意義、紫外燈能量不足。解決方法：更換新的紫外燈
4規模最大、流動(dòng)相污染關註度、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。解決方法：檢查流動(dòng)相的組成重要手段，使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級(jí)的溶劑穩中求進。
5、樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)（高K’值）以饅頭峰樣被洗脫出不折不扣，從而表現(xiàn)出一個(gè)逐步升高的基線再獲。解決方法：使用保護(hù)柱，如有必要最深厚的底氣，在進(jìn)樣之間敢於挑戰。在分析過(guò)程中，定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子應用擴展。
6過程中、檢測(cè)器沒(méi)有設(shè)定在zui大吸收波長(zhǎng)處。解決方法：將波長(zhǎng)調(diào)整至zui大吸收波長(zhǎng)處
7建立和完善、流動(dòng)相的PH值沒(méi)有調(diào)節(jié)好特征更加明顯。解決方法：加適量的酸或堿調(diào)至*PH值
2.2.2保留時(shí)間漂移 保留時(shí)間重現(xiàn)是液相性能好壞的一個(gè)重要標(biāo)志，同一種東西紮實做，兩次的保留時(shí)間相差不要超過(guò)15s連日來，超過(guò)了半分鐘可看做保留時(shí)間漂移，就無(wú)法進(jìn)行定性不斷進步，你要考慮以下原因：
1信息化技術、溫控不當(dāng)。解決方法：調(diào)好柱溫認為，檢查是否有打開(kāi)的窗戶(hù)或空調(diào)對(duì)著柱溫箱責任製。
2、流動(dòng)相比例變化良好。解決方法：檢查四元泵的比例閥是否有故障
3雙重提升、色譜柱沒(méi)有平衡增強。解決方法：在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱
4、流速變化結果。解決方法：重新設(shè)定流速
5戰略布局、泵中有氣泡。解決方法：規則製定、從泵中除去氣泡
2.3 峰型異常問(wèn)題 峰型問(wèn)題是液相的主要問(wèn)題講道理，在做液相過(guò)程中，我們就是要變換不同的條件來(lái)改善不好的峰型表現明顯更佳，對(duì)于各種各樣的異常峰更加廣闊，要區(qū)別對(duì)待，從主要問(wèn)題出發(fā)技術先進，一個(gè)一個(gè)加以解決示範。
1、色譜圖中未出峰提高。解決方法：系統(tǒng)未進(jìn)樣或樣品分解發展基礎；泵未輸液或流動(dòng)相使用不正確；檢測(cè)器設(shè)置不正確有很大提升空間；針對(duì)以上情況成因作相應(yīng)調(diào)整即可特點。
2、一個(gè)峰或幾個(gè)峰是負(fù)峰情況正常。解決方法：流動(dòng)相吸收本底高製度保障；進(jìn)樣過(guò)程中進(jìn)入空氣；樣品組分的吸收低于流動(dòng)相深入交流研討。
3模式、所有峰均為負(fù)峰。解決方法：信號(hào)電纜接反或檢測(cè)器輸出極性設(shè)置顛倒集聚效應；光學(xué)裝置尚未達(dá)到平衡貢獻。
4、所有峰均為寬峰提升。解決方法：系統(tǒng)未達(dá)到平衡持續；溶解樣品的溶劑極性比流動(dòng)相差很多；色譜柱尺寸及類(lèi)型選擇不正確；色譜柱或保護(hù)柱被污染或柱效降低高品質；溫度變化造成的影響。 互動講、
5統籌、所出峰比預(yù)想的小。解決方法：樣品黏度過(guò)大；進(jìn)樣品故障或進(jìn)樣體積誤差產品和服務；檢測(cè)器設(shè)置不正確．定量環(huán)體積不正確像一棵樹；檢測(cè)池污染；檢測(cè)器燈出現(xiàn)問(wèn)題不斷創新。
6高效利用、出現(xiàn)雙峰或肩峰。解決方法：進(jìn)樣量過(guò)大去突破；樣品濃度過(guò)高品質；保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞；保護(hù)拄或色譜柱污染或失效；柱塌陷或形成短通道全面協議。
7重要作用、前伸峰堅持先行。解決方法：進(jìn)樣量或樣品濃度高；溶解樣品的溶劑較流動(dòng)相極性強(qiáng)增幅最大；保護(hù)柱或色譜柱污染或失效具體而言。
8、拖尾峰滿意度。解決方法：柱超載奮戰不懈，降低樣品量；增加柱直徑采用較高容量的固定相逐步顯現；峰干擾作用，對(duì)樣品進(jìn)行清潔過(guò)濾；調(diào)整流動(dòng)相近年來；硅羥基作用銘記囑托，加入三乙胺，用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相pH值交流等；柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效製造業，更換燒結(jié)不銹鋼；加在線過(guò)濾器自動化裝置，對(duì)樣品進(jìn)行過(guò)濾狀態；死體積或柱外體積過(guò)大，將連接點(diǎn)降至zui低關規定；盡可能使用內(nèi)徑較細(xì)的連接管更多的合作機會；柱效下降，更換柱子指導；采用保護(hù)柱方便，對(duì)柱子進(jìn)行再生。
9更好、出現(xiàn)平頭峰基石之一。解決方法：檢測(cè)器設(shè)置不正確基礎上；進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高。
10行業分類、出現(xiàn)鬼峰預下達。解決方法：進(jìn)樣閥殘余峰，在每次進(jìn)完樣后用充足的時(shí)間來(lái)平衡和清洗系統(tǒng)應用領域；樣品中存在未知物創新為先，改進(jìn)樣品的預(yù)處理；流動(dòng)相污染統籌推進，更換新流動(dòng)相行業內卷，盡可能現(xiàn)配現(xiàn)用，隔夜的流動(dòng)相再次使用時(shí)要過(guò)濾科普活動；盡可能使用HPLC級(jí)試劑凝聚力量；流路中有小的氣泡，打開(kāi)Purge閥逐漸完善，加大流速排除。
3 結(jié)語(yǔ)
以上內(nèi)容只是對(duì)液相色譜中出現(xiàn)的常見(jiàn)的問(wèn)題進(jìn)行了分析，在故障排除時(shí)要遵守以下原則：一次只改變一個(gè)因素穩定性，確定假定因素與問(wèn)題之間的最深厚的底氣；如果通過(guò)更換組件來(lái)排查故障時(shí)要注意將拆下的完好組件裝回原位，避免浪費(fèi)資源優勢；這是成功進(jìn)行故障排除的關(guān)鍵應用擴展。總之振奮起來，在使用液相色譜時(shí)一定要注意樣品的前處理與儀器的正確操作和保養(yǎng)建立和完善。
